ما هو الفرق بين ELISA و Dot ELISA

جدول المحتويات:

Anonim

ال الفرق الرئيسي بين ELISA و Dot ELISA هو ذلك تساعد ELISA في اكتشاف وتقدير الأجسام المضادة أو الهرمونات أو الببتيدات أو البروتينات الأخرى في عينة بيولوجية بينما ، في Dot-ELISA ، تترسب الركيزة الصبغية فقط في منطقة نشاط الإنزيم. علاوة على ذلك ، فإن الأنواع الرئيسية الثلاثة من ELISA هي ELISA المباشر ، و ELISA غير المباشر ، والقياس المناعي أو ELISA بينما تعد dot-ELISA نوعًا من المقايسات المناعية لإنزيم المرحلة الصلبة ، مثل ELISA الشائع.

ELISA و dot-ELISA نوعان من الأدوات المناعية المستخدمة لاكتشاف وقياس كمية البروتينات وخاصة المستضدات. إنها فحوصات أسرع ومرنة وقابلة للتكرار وحساسة للغاية وعالية الإنتاجية.

ELISA المباشر ، Dot ELISA ، ELISA ، المقايسات المناعية ، ELISA غير المباشر ، ساندويتش ELISA

ما هو إليسا

إليسا (انزيم مرتبط المناعي فحص) هو نوع من المقايسة المناعية لإنزيم المرحلة الصلبة المسؤولة عن اكتشاف بروتينات معينة في العينات البيولوجية بمساعدة الأجسام المضادة الأولية. في هذا الاختبار ، يساعد التفاعل الإنزيمي في اكتشاف الأجسام المضادة الأولية المرتبطة. هنا ، يستخدم الإنزيم ركيزة كروموجينية لتطوير اللون. علاوة على ذلك ، فإن المرحلة الصلبة المستخدمة بواسطة ELISA هي أساسًا لوحة ميكروتيتر.

الشكل 1: لوحة ميكروتيتر

علاوة على ذلك ، هناك ثلاثة أنواع رئيسية من ELISA بناءً على المنهجية.

إليسا المباشر

في ELISA المباشر ، يؤدي طلاء سطح الصفيحة بالعينة إلى تمكين الأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم من الارتباط بالبروتين المحدد الموجود على اللوحة. بعد ذلك ، تساعد إضافة الركيزة الكروموجينية في اكتشاف الأجسام المضادة المرتبطة بالبروتين.

الشكل 2: إليسا المباشر

ELISA غير المباشر

يتضمن ELISA غير المباشر اكتشاف بروتين معين في عينة من خلال عملية ربط من خطوتين. هنا ، تتمثل الخطوة الأولى في طلاء صفيحة بالعينة واحتضانها بنوع معين من الجسم المضاد الأولي. بعد ذلك ، فإن الخطوة التالية هي احتضان هذه اللوحة بجسم مضاد ثانوي ، والذي يرتبط بالجسم المضاد الأساسي. علاوة على ذلك ، يرتبط هذا الجسم المضاد الثانوي بإنزيم. لذلك ، فإن إضافة الركيزة الكروموجينية تساعد في اكتشاف البروتين المحدد على اللوحة باستخدام تطوير اللون.

جهاز قياس المناعة / أليسا

في شطيرة ELISA ، تتمثل الخطوة الأولى في شطيرة البروتين المحدد الذي سيتم اكتشافه من العينة بين الجسم المضاد الأولي والثانوي. هنا ، تتمثل العملية الأولى في تغطية اللوحة بالجسم المضاد الأساسي ، ولكن ليس بالعينة. بعد ذلك ، تكون العملية التالية هي احتضان العينة بهذه اللوحة. بعد ذلك ، يمكن الكشف عن البروتين المحدد المرتبط بالجسم المضاد الأولي بمساعدة الجسم المضاد الثانوي.

ما هو دوت إليسا

Dot-ELISA هو نوع من المقايسات المناعية لإنزيم المرحلة الصلبة. الميزة الأكثر أهمية لـ dot-ELISA هي ترسيب الركيزة الكروموجينية فقط في المنطقة ذات النشاط الأنزيمي. هنا ، المرحلة الصلبة هي غشاء النيتروسليلوز ، والذي يسمح بربط البروتينات بالسطح. بعد احتضان العينة بغشاء النيتروسليلوز ، يتم غسل العينة الزائدة بعيدًا ، ويتم حظر السطح غير المرتبط بغشاء النيتروسليلوز.

الشكل 3: نقطة إليسا

ثم يضاف الجسم المضاد الأولي إلى غشاء النيتروسليلوز. أخيرًا ، تساعد إضافة الجسم المضاد الثانوي المرتبط بالإنزيم في اكتشاف الأجسام المضادة الثانوية المرتبطة بالبروتين. وبالتالي ، فإن هذا يسمح لمركب البروتين والجسم المضاد بالظهور كنقطة واضحة على غشاء النيتروسليلوز.

ما هي أوجه التشابه بين ELISA و Dot ELISA

ما هو الفرق بين ELISA و Dot ELISA

تعريف

يشير ELISA (مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم) إلى اختبار كيميائي مناعي سريع يتضمن إنزيمًا يستخدم لقياس مجموعة متنوعة من اختبارات سوائل الجسم بينما تشير نقطة ELISA إلى اختبار مناعي في المرحلة الصلبة يمكن استخدامه للكشف عن المستضد أو الجسم المضاد. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين ELISA و dot ELISA.

أنواع

الأنواع الثلاثة من ELISA هي ELISA المباشر ، و ELISA غير المباشر ، و sandwich ELISA بينما نقطة ELISA هي نوع من شطيرة ELISA.

طريقة

يتضمن ELISA اكتشاف بروتين معين بمساعدة جسم مضاد واكتشاف الأجسام المضادة المرتبطة من خلال تفاعل إنزيمي بينما في نقطة ELISA ، لا ترتبط الركيزة الصبغية إلا بالمنطقة ذات النشاط الأنزيمي. وبالتالي ، هذا فرق آخر بين ELISA و dot ELISA.

الحالة الصلبة

هناك اختلاف آخر بين ELISA و dot ELISA وهو أن ELISA تستخدم بشكل أساسي ألواح ميكروتيتر كمرحلة صلبة بينما تستخدم dot-ELISA أغشية النيتروسليلوز كمرحلة صلبة.

استنتاج

ELISA هو نوع من المقايسة المناعية التي تتضمن الكشف عن بروتين معين في عينة بيولوجية بمساعدة الجسم المضاد. هنا ، يتم تطوير اللون من خلال تفاعل إنزيمي في الكشف عن الأجسام المضادة المرتبطة بالبروتين. بالإضافة إلى ذلك ، فإن نقطة ELISA هي نوع من شطائر ELISA. هنا ، تترسب الركيزة الكروموجينية في المناطق ذات النشاط الأنزيمي. لذلك ، فإن الاختلاف الرئيسي بين ELISA و dot ELISA هو طريقة الكشف.

المرجعي:

1. "ملاحظة فنية: ما هي الاختلافات بين أنواع فحص ELISA؟" Enzo Life Sciences ، 27 يوليو 2018 ، متاح هنا 2. Z ، سفوبودوفا. "اختبار تقارب Dot-ELISA: طريقة سهلة ومنخفضة التكلفة لتقدير نشاط الربط للأجسام المضادة وحيدة النسيلة." مجلة التقنيات التحليلية و Bioanalytical ، المجلد. 04 ، لا. 03 ، 2013 ، دوى: 10.4172 / 2155-9872.1000168.

الصورة مجاملة:

1. "لوحة Microtiter" بقلم Jeffrey M. Vinocur - عمل خاص (CC BY 2.5) عبر Commons Wikimedia 2. "مخطط ELISA" بواسطة Cavitri - عمل خاص (CC BY 3.0) عبر Commons Wikimedia 3. "Dot-Elisa" بواسطة MrPotatoDeluxe - العمل الخاص (CC BY-SA 3.0) عبر ويكيميديا ​​كومنز

ما هو الفرق بين ELISA و Dot ELISA